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介紹下常用的鉬釩酸顯色液都有哪些
更新時(shí)間:2019-12-27
鉬釩酸顯色液
是一種將生化反應(yīng)后產(chǎn)生的復(fù)合物顯色以達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡囊环N試劑。一般又稱底物液。
顯色劑有兩類:通用顯色劑和*顯色劑。根據(jù)被檢物的化學(xué)組成是否遭受破壞,顯色劑分為破壞性顯色劑和非破壞性顯色劑。
在實(shí)驗(yàn)中我們一般將它調(diào)配成A,B兩種液體,當(dāng)需要顯色時(shí)就分別加入A,B液,當(dāng)混合液與實(shí)驗(yàn)中復(fù)合物(抗原抗體復(fù)合物)反應(yīng)就會(huì)產(chǎn)生顯色效果。
A液一般由:PBS緩沖液,檸檬酸,ED-TA乙二氨四乙酸,ProcLin-300,過氧化氫(過氧化氫揮發(fā)性太高,容易丟失,我們現(xiàn)在正用過氧化脲來代替,效果還不錯(cuò))組成。
B液一般由:PBS緩沖液,檸檬酸,ED-TA乙二氨四乙酸,ProcLin-300,硫代硫酸鈉等。
由于鉬釩酸顯色液的反應(yīng)一旦開始就一直持續(xù)反應(yīng),所以,當(dāng)達(dá)到理想效果時(shí)一定要終止反映,就需要加入終止液了。
有些生物堿能和某些試劑反應(yīng)生成特殊的顏色,叫做顯色反應(yīng),常用于鑒識(shí)某種生物堿。但顯色反應(yīng)受生物堿純度的影響很大,生物堿愈純,顏色愈明顯。常用的
鉬釩酸顯色液
有:
(1)礬酸銨一濃硫酸溶液(Mandelin試劑)為1%礬酸銨的濃硫酸溶液。如遇阿托品顯紅色。
(2)鉬酸銨一濃硫酸溶液(Frohde試劑)為1%鉬酸鈉或鉬酸銨的濃硫酸溶液,如遇小檗堿顯棕綠色,阿托品不顯色。
(3)甲醛一濃硫酸試劑(Marquis試劑)為30%甲醛溶液0.2ml與10ml濃硫酸的混合溶液。如遇嗎啡顯橙色至紫色。
(4)濃硫酸 如遇小檗堿顯綠色,阿托品不顯色。
(5)濃硝酸 如遇小檗堿顯棕紅色,秋水仙堿顯藍(lán)色。
生物堿的顯色反應(yīng)原理尚不太明了,一般認(rèn)為是氧化反應(yīng)、脫水反應(yīng)、縮合反應(yīng)或氧化、脫水與縮合的共同反應(yīng)。
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